Zakres
W ISO 9308-2 określono metodę oznaczania ilościowego Escherichia coli i bakterii grupy coli w wodzie. Podstawą metody jest hodowla na podłożu płynnym, a wartość „najbardziej prawdopodobnej liczby” poszukiwanych organizmów odczytuje się z tablic NPL. Metoda ta może być stosowana do wszystkich rodzajów wód, w tym wód bogatych w zawiesiny i zawierających dużą liczbę heterotroficznych bakterii mikroflory towarzyszącej. Jednak metody tej nie powinno się stosować do oznaczania ilościowego bakterii grupy coli w wodzie morskiej. W przypadku określania liczby E. coli w wodzie morskiej, wskazane jest przygotowanie rozcieńczenia próbki 1:10 w jałowej wodzie. Metoda ta może być jednak z powodzeniem bezpośrednio stosowana do próbek wody morskiej o niższym zasoleniu. W przypadku braku danych uzasadniających stosowanie tej metody bez rozcieńczeń stosuje się rozcieńczenie 1:10.
Zasada stosowania tej metody do wykrywania E. coli, oparta jest na zdolności tych bakterii do wytwarzania enzymu β-D-glukuronidazy, a zatem nie jest ona wskazana do wykrywania enterokrwotocznych E. coli, które nie wykazują typowej ekspresji tego enzymu. Ponadto, istnieje niewielka grupa innych szczepów E. coli, które nie wytwarzają β-D-glukuronidazy.
Wybór badań stosowanych do wykrywania i potwierdzania bakterii grupy coli, w tym E. coli, można rozpatrywać jako ciąg następujących po sobie badań cząstkowych. Zakres badań potwierdzających dla określonej próbki wody zależy częściowo od rodzaju wody, a częściowo od celu badania. Metoda opisana w niniejszej części normy ISO umożliwia uzyskanie potwierdzonego wyniku, bez konieczności wykonywania dalszych badań studzienek z reakcją pozytywną.
UWAGA Metoda opisuje sposób oznaczania liczby bakterii, przy użyciu komercyjnego testu, jednak opisane w nim podłoże może być również zastosowane w standardowym formacie metody NPL.